背景与研究目的
猫传染性腹膜炎（FIP）是一种由猫冠状病毒（FCoV）变异引起的致命性疾病，主要影响幼猫和年轻猫。FIP的发病机制复杂，涉及免疫病理现象，其中抗体依赖性增强效应（ADE）被认为是重要的致病因素之一。尽管FIP的发病与细胞介导免疫（CMI）密切相关，但抗体的保护作用和病理性仍未完全阐明。
减毒疫苗为FIP的预防提供了潜在策略，但其效果受限。本研究评估了减毒型FIPV-UCD1株的免疫反应，分析了疫苗接种后疾病结局与细胞因子动态之间的关系，并探讨其在保护性免疫中的作用机制。
研究方法
实验设计
- 实验动物：
- 10只雄性SPF级家猫，年龄约5个月。
- 疫苗接种与挑战实验：
- 8只猫接种减毒型FIPV-UCD1株（腹腔注射，剂量1 ml），另2只作为对照组接种PBS。
- 接种32天后，所有猫通过腹腔注射1 ml高毒力FIPV-UCD8株进行病毒挑战。
- 数据采集：
- 采集接种前和接种后的多时间点血液样本，监测抗体效价和细胞因子水平。
- 通过终末期尸检和病理分析评估疾病类型和结局。
实验检测
- 抗体效价测定：
- 使用间接免疫荧光抗体（IFA）检测血清抗FIPV抗体效价。
- 细胞因子分析：
- 提取外周血单核细胞（PBMC）RNA，实时定量PCR检测TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12 p40和IL-18的mRNA水平。
- 病理学分析：
- 通过组织切片和染色观察病理特征，包括湿性和干性FIP的典型表现。
研究结果
疫苗接种与免疫响应
- 抗体效价：
- 接种后，8只免疫猫均产生可检测的抗FIPV抗体，但抗体水平较低，且随时间稳定。
- 挑战后，抗体效价在湿性FIP猫中显著升高，而干性FIP猫和免疫保护猫的抗体效价变化不明显。
- 细胞因子动态：
- 湿性FIP猫表现为高TNF-α和低IFN-γ水平。
- 干性FIP猫的TNF-α水平中等，IFN-γ轻度升高。
- 免疫保护猫表现出高IFN-γ和低TNF-α水平，显示明显的Th1型免疫偏向。
疾病结局
- 结局分类：
- 湿性FIP（3只）：病毒快速扩散，伴有腹水和胸水积聚。
- 干性FIP（2只）：局限性肉芽肿病变，主要集中于脏器。
- 加速型FIP（1只）：挑战后4天内快速发病，病情恶化。
- 免疫保护（2只）：无临床症状，无病理损伤。
- 对照组：
- PBS组2只猫无感染症状，显示对挑战病毒的完全抗性。
细胞因子与疾病类型的相关性
- 湿性FIP：
- TNF-α显著升高，IL-6和IL-10水平上调，表明炎症反应增强。
- 干性FIP：
- IL-12 p40和IFN-γ轻度上调，提示有限的Th1型反应。
- 免疫保护：
- IFN-γ水平显著高于其他组，TNF-α和IL-6水平维持低值，反映出有效的免疫平衡。
讨论
疫苗的免疫效果
- 减毒型FIPV-UCD1疫苗在部分猫中诱导了保护性免疫，但对所有接种动物的保护能力不一致。
- 研究结果支持Th1型免疫（以高IFN-γ和低TNF-α为特征）在FIP病毒清除中的关键作用。
细胞因子与疾病结局的联系
- TNF-α在湿性FIP中的显著上调表明其可能参与炎症介导的病理过程。
- IFN-γ水平的升高与免疫保护相关，提示其作为FIP疫苗设计中的潜在靶点。
疫苗局限性与改进方向
- 当前疫苗的保护性免疫效果有限，抗体增强效应（ADE）可能在部分个体中诱发更严重的病理反应。
- 未来疫苗开发应重点关注诱导持久而平衡的Th1型免疫，同时降低抗体依赖性增强的风险。
结论
减毒型FIPV-UCD1疫苗能在部分猫中提供保护性免疫，表明细胞因子响应（特别是IFN-γ和TNF-α的平衡）对FIP结局的决定性作用。然而，疫苗的整体效果仍受限，未来研究需进一步优化其免疫效能，并深入探索ADE的潜在机制。
参考文献：
Disease outcome and cytokine responses in cats immunized with an avirulent feline infectious peritonitis virus (FIPV)-UCD1 and challenge-exposed with virulent FIPV-UCD8
